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一種單增李斯特菌的分離方法

更新時間:2018-09-18  |  點擊率:1078

涉及食品安全的一個主要因素是由致病性微生物引起的食源性疾病。在各地發(fā)生的一系列食源性疾病中,單核細胞增生性李斯特菌占著主要的地位。單核細胞增生性李斯特菌簡稱為單增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM),是李斯特菌屬(Listeria)中能引起人畜共患病的食源性病原菌,是食品中四大病原菌之一。1988年,WHO發(fā)表了“食源性李斯特菌病”勸告書,指導(dǎo)世界各國如何預(yù)防的污染和中毒,勸告各公共衛(wèi)生機構(gòu)加強監(jiān)測的力度,同時也將其列為食源性病菌重點檢測的對象之一。目前,雖然我國沒有發(fā)生大規(guī)模爆發(fā)流行,但卻有大量關(guān)于食品被單增李斯特菌污染的報告,這同樣引起了人們的關(guān)注。

 

如何有效分離和鑒定出單增李斯特菌,成為食品安全的重要問題。我國關(guān)于食品中李斯特菌的檢驗根據(jù)我國食品安全國家標準GB 4798.30-2010,包括增菌、分離和鑒定 3 個環(huán)節(jié)。目前,分離環(huán)節(jié)常會采用顯色培養(yǎng)基,使其菌落顏色不同于其它干擾菌,實現(xiàn)快速分離。

 

HiMedia公司(微生物培養(yǎng)基生產(chǎn)商)生產(chǎn)的單增李斯特菌顯色培養(yǎng)基(HiCrome標識,貨號MV1540),該培養(yǎng)基是根據(jù)ottaviani 和 Agosti 開發(fā)的單核細胞增生李斯特氏菌鑒別基礎(chǔ)培養(yǎng)基,用于從食物和動物飼料中選擇性分離鑒別單核細胞增生李斯特氏菌,在這款李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基在該培養(yǎng)基配方上略作改良,它在制備時用無瘋牛病風險的植物蛋白胨取代了動物蛋白胨。

 

培養(yǎng)基中的HiVeg蛋白胨1號、HiVeg水解物、酵母粉和丙酮酸鈉提供了細菌生長所必需的營養(yǎng)和氮源物質(zhì)。葡萄糖是可發(fā)酵的碳水化合物。氯化鈉維持滲透壓平衡。磷酸鹽是緩沖液成分。氯化鋰和選擇性添加劑(FD212和FD213)抑制伴隨的菌群生長,而允許李斯特氏菌生長。李斯特氏菌水解顯色底物,產(chǎn)生綠色菌落。從其它李斯特氏菌中鑒別出單核細胞增生李斯特氏菌,是依據(jù)其*的磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C(PIPLC)活性。磷脂酶C水解培養(yǎng)基中的底物添加劑(貨號FD214)導(dǎo)致單核細胞增生李斯特氏菌菌落周圍產(chǎn)生不透明的暈環(huán)。由于單核細胞增生李斯特氏菌和英諾克李斯特氏菌具有相似的生化特性,傳統(tǒng)培養(yǎng)基(PALCAM培養(yǎng)基)不能區(qū)分,使用該培養(yǎng)基可以有效區(qū)分開,且該培養(yǎng)基成分*符合我國國家標準,HiMedia公司產(chǎn)品有認證的GMP,CE和FDA,ISO9001,ISO13485等證書,品質(zhì),值得信賴。

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