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大腸桿菌O157選擇性顯色培養(yǎng)基(國(guó)標(biāo))

更新時(shí)間:2020-02-18  |  點(diǎn)擊率:1352

 

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

存儲(chǔ)

MV1575A

HiCrome™ EC O157:H7 Selective Agar Base,Modified(需添加劑FD187)

100G,500G

2-8℃密閉

FD187

HiCrome EC O157:H7 Selective Supplement

5VL

2-8℃

 

原理

腸出血性大腸桿菌又名為產(chǎn)Vero細(xì)胞毒素的大腸桿菌(VTEC/EHEC)。盡管有許多血清型大腸桿菌產(chǎn)Vero細(xì)胞毒素(3),但大腸桿菌O157:H7是導(dǎo)致人類感染的常見(jiàn)的一種。它有幾種不常見(jiàn)的生化特性可用于鑒定。它屬于僅少數(shù)的beta葡萄糖醛酸酶(-),24小時(shí)內(nèi)不發(fā)酵山梨醇或鼠李糖。它們可從接種到含山梨醇而非乳糖的培養(yǎng)基的糞便標(biāo)本中分離出來(lái)。

 

該款顯色培養(yǎng)基采用植物源蛋白胨,以取代動(dòng)物源,避免了BSE/TSE風(fēng)險(xiǎn)。它基于 Rappaport 和Henigh(1)描述的配方而成。培養(yǎng)基含山梨醇和顯色混合劑,不含乳糖和指示劑染料。顯色劑被大腸桿菌O157:H7 特異性裂解,產(chǎn)生深紫至洋紅色。普通大腸桿菌形成藍(lán)綠色菌落。

 

培養(yǎng)基中的HiVeg的水解物和酵母粉提供碳源、氮源營(yíng)養(yǎng)和長(zhǎng)鏈氨基酸、維生素和其他生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)。氯化鈉維持滲透壓平衡。添加劑使培養(yǎng)基更具有選擇性(2)。添加劑中的亞碲酸鉀選擇性抑制氣單胞菌和普羅威登菌。添加劑中的新生霉素抑制革蘭陽(yáng)性菌。月桂基硫酸鈉抑制伴隨的革蘭陽(yáng)性菌群。

 

培養(yǎng)基成分

組成                                G/L

HiVeg的水解物                   5.000

酵母粉                           3.000

山梨醇                           7.000  

合成離子活性劑1號(hào)         1.500

月桂基硫酸鈉                  0.100

顯色混合劑                     0.250

瓊脂                              15.000

pH(25°C) 6.8±0.2

 

配制

31.85g溶于990ml蒸餾水,加熱至沸使*溶解。高壓滅菌后,冷卻至45-50℃,無(wú)菌加入復(fù)溶的添加劑(貨號(hào)FD187,先用10ml蒸餾水復(fù)溶)?;靹虿A注平板。

 

質(zhì)量控制

外觀:奶油色至黃色均一自由粉末

成膠性: 牢固,與1.5%瓊脂相當(dāng)

制備好的培養(yǎng)基顏色和透明度:在平皿中為淺琥珀色,透明至輕微不透明凝膠

配比反應(yīng)25°C下3.18% w/v水溶液,pH值為6.8±0.2

pH值要求6.60-7.00

培養(yǎng)反應(yīng)

加入添加劑(貨號(hào)FD187)后,在35-37°C培養(yǎng)18-24小時(shí),觀察如下:

 

菌種

接種量(CFU)

生長(zhǎng)狀況

回收率

菌落顏色

大腸桿菌ATCC 25922

50-100

生長(zhǎng)很少

≤10%

藍(lán)綠色

大腸桿菌O157:H7 NCTC 12900

50-100

旺盛

≥50%

深紫-洋紅色

肺炎克雷伯菌

ATCC 13883

50-100

一般-好

30-40%

無(wú)色-淡紫色(黏液狀)

銅綠假單胞菌

ATCC 27853

50-100

一般-好

30-40%

無(wú)色

金黃色葡萄球菌

ATCC 25923

≥103

抑制

0%

 

枯草芽孢桿菌

ATCC 6633

≥103

抑制

0%

 

 

參考文獻(xiàn)

1.Rappaport F.and Henigh E.,1952,J.Clin.Pathol.,5:361.

2.Zadik P.M.,Cahpman P.A.and Siddons C. A.,1993,J.Med.Microbiol.,39,155-158.

3.Smith and Scottland,1988,J.Med.Microbiol.,26:77-85

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