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支原體DNA提取試劑盒

更新時間:2020-10-14  |  點擊率:884

支原體檢測的核酸法,已廣泛應用于細胞支原體篩查和生物制品企業(yè)的生產放行檢測中。

但在使用PCR方法檢測支原體之前,由于有些待檢樣品的成分過于復雜,或含有的某些成分會抑制PCR反應的進行,因此需要使用『支原體DNA提取試劑盒』提前做DNA的提取工作。

對于生物藥或需遵循藥典的樣本,也由于樣品基質可能會影響檢測的靈敏度,因此需要樣本做DNA抽提處理,實現核酸法gao的靈敏度。

這里向您推薦德國MB公司生產的支原體DNA提取試劑盒

英文品名:

Venor®GeM Sample Preparation Kit

該試劑盒已經過多方廣泛驗證,有很多引用文獻;

它已達到歐洲藥典標準,可用于PCR或qPCR檢測支原體的方法學驗證。

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產品信息:

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產品特點

1)符合歐洲藥典的要求。

2)采用離心管柱的方法,全程只需30分鐘。

2)從細胞上清和生物制品中,均可分離支原體DNA。

3)洗脫DNA純度高,體積50μl,保證PCR大的靈敏度。

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操作步驟

四步法:

1)細胞裂解

2)DNA吸附到核酸純化柱上

3)去除殘留污染物和抑制劑

4)DNA洗脫

試劑盒組分:

Spin columns(核酸純化住)

Collection tubes(收集管)

Conditioner液

Binding Buffer液

Buffer A1液

Buffer A2液

Buffer E液

操作示意圖:

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所需其他材料及儀器:

  • >96%無水乙醇
  • EP管(1.5ml或2ml)
  • 離心機和恒溫儀(用于1.5ml 或2ml 離心管)
  • 移液器及帶濾芯吸頭(100μl 和1000μl)
  • 可選:蛋白酶K(貨號56-0002),用于處理富含蛋白(>10mg/ml)的樣品。
  • 可選:DNA 內控對照,用于配合

Venor®GeM Classic Kit(貨號11-1025)

以保證操作過程沒有問題。

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注意事項:

1. 支原體DNA 提取試劑盒一次可從多含有1X 106 細胞/ml 的細胞上清中直接分離DNA。

2. 富含蛋白的樣本(蛋白含量>10mg/ml)可能需要蛋白酶K 處理后,再抽提DNA。

3. 此試劑盒不適于提取真核細胞組織的DNA。

4. 若在提取DNA時加入了內控DNA對照,則在支原體核酸法檢測時不需要再加內控對照。我們推薦使用對照,以驗證結果的可靠性,也有助于排除故障。

5. 不要使用其他酒精來替代乙醇,它將導致核酸產量的下降。

6. 緩沖液E(Buffer E)的預熱,會顯著改善核酸的產量。

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