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科研人員,在哪幾種情況下對(duì)應(yīng)對(duì)胎牛血清內(nèi)毒素格外留意

更新時(shí)間:2020-11-02  |  點(diǎn)擊率:735

胎牛血清主要的作用就是提供基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及提供接觸和伸展因子,有效避免細(xì)胞貼壁受到機(jī)械的損傷。本文締一生物為您分析科研人員,在哪幾種情況下對(duì)應(yīng)對(duì)胎牛血清內(nèi)毒素格外留意。

 

1.養(yǎng)干細(xì)胞時(shí),干細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時(shí),干細(xì)胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過(guò)提早審核該批次《檢測(cè)報(bào)告》,以決定是否入圍進(jìn)行試用。

2.養(yǎng)免疫細(xì)胞時(shí),過(guò)高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。

3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑,都會(huì)讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時(shí),選擇極低的內(nèi)毒素(hao≤1EU/ml),對(duì)實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要;

4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細(xì)胞轉(zhuǎn)染,或者肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細(xì)胞的擴(kuò)增,這些都需要挑選好的血清給細(xì)胞以有力支持。因此,挑選更低的內(nèi)毒素,是保證實(shí)驗(yàn)順利的第yi步。

5.實(shí)驗(yàn)室有些細(xì)胞,需要長(zhǎng)期培養(yǎng)、長(zhǎng)期凍存,或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會(huì)經(jīng)?;蜷L(zhǎng)時(shí)間作用于細(xì)胞。為保證細(xì)胞的健康,都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長(zhǎng)久對(duì)細(xì)胞的毒性影響。

 

總之,血清中內(nèi)毒素含量過(guò)高,更容易導(dǎo)致細(xì)胞“亞健康”,造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn),或細(xì)胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導(dǎo)致試驗(yàn)中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。

 

全qiu細(xì)胞培養(yǎng)學(xué)會(huì)均依據(jù)內(nèi)毒素對(duì)血清的品質(zhì)進(jìn)行分級(jí)和命名。

內(nèi)毒素含量越低的血清,級(jí)別就越高,以胎牛血清為例:

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時(shí),此血清為特級(jí)胎牛血清;

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時(shí),此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清;

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時(shí),此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清;

目前,由于同一廠家,不同批次的血清,內(nèi)毒素?cái)?shù)值也可能有較大差異,因此很多血清廠家在名稱上已不注明級(jí)別。但使用者仍可通過(guò)檢測(cè)報(bào)告,自行甄別挑選。)

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