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哪些細胞培養(yǎng)時,對內毒素水平格外敏感

更新時間:2020-11-13  |  點擊率:777

胎牛血清主要的作用就是提供基本的營養(yǎng)物質以及提供接觸和伸展因子,它

是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細胞的培養(yǎng),一旦胚胎發(fā)育*這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。

 

有下列情況者,對血清內毒素應格外留意篩選:

 

1.養(yǎng)干細胞時,干細胞對內毒素非常敏感,如果血清中內毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。

 

2.養(yǎng)免疫細胞時,過高的內毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。

 

3.基因敲除相關的細胞實驗,培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結果“失之毫厘,謬以千里”。在準備血清和其他試劑時,選擇極低的內毒素(hao≤1EU/ml),對實驗至關重要;

 

4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細胞轉染,或者肝細胞、神經(jīng)細胞、內皮等難養(yǎng)細胞的擴增,這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此,挑選更低的內毒素,是保證實驗順利的第yi步。

 

5.實驗室有些細胞,需要長期培養(yǎng)、長期凍存,或者經(jīng)常復蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會經(jīng)常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應該選用更低內毒素的血清,以避免內毒素長久對細胞的毒性影響。

 

總之,血清中內毒素含量過高,更容易導致細胞“亞健康”,造成數(shù)據(jù)不準,或細胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導致試驗中斷失敗。血清中的內毒素越低越好。

 

因此,應選擇那些內毒素含量低的血清(如Ausbian等),含量hao在3EU/ml以下。內毒素與血清加工制備時的生產衛(wèi)生條件和工藝關系較大。

 

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