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為什么在細胞培養(yǎng)中要添加胎牛血清

更新時間:2021-07-23  |  點擊率:1471

血清是一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已為人所知,但還有一部分尚不清楚,而且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。

1.蛋白質(zhì)是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白。纖維粘連素細胞促進細胞附著;α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用;胎牛血清中含胎球蛋白促細胞附著;轉(zhuǎn)鐵蛋白能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用。

2.多肽:血小板促生長因子能促細胞分裂,是多肽家庭的主要成員之一,是主要的促細胞增殖因子;成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經(jīng)細胞生長因子等,血清中含量雖很少,但對細胞生長也有一定作用。

3.激素:激素對細胞的作用是多方面的。胰島素:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細胞分裂有關(guān)。類胰島素生長因子:能與細胞表達的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用。促生長激素:促細胞增殖效應(yīng)。氫化ke的松:血清中含有定量的該成分,它可能兼有促細胞貼附和增殖作用,但有人證明,血清中的氫化ke的松,如細胞密度高時可能有抑制細胞的作用和誘導(dǎo)其發(fā)生分化。

4.其他成本:氨基酸、葡萄糖、酮酸等對多種營養(yǎng)成分的合成培養(yǎng)基意義不大。與蛋白相結(jié)合狀態(tài)的微量元素對細胞培養(yǎng)有意義。

胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。

由于胎牛從未接觸過外界, 與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養(yǎng)細胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險也較低,是理想的細胞生長補充劑。本文締一生物為您具體分析胎牛血清在細胞培養(yǎng)中的作用。

1. 提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。

2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

3. 有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。

4. 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。

5. 起酸堿度緩沖液作用。

6. 提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

7. 參與細胞凍存。

在細胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(最常見為10%)的。具體到不同試驗,應(yīng)依據(jù)文獻報導(dǎo),或細胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來確定最佳濃度。

胎牛血清應(yīng)在-20℃儲存,運輸應(yīng)干冰冷鏈運輸,避免反復(fù)凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。


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