公车上拨开丁字裤进入电影,久久99精品久久久久久无毒不卡,国产丰满老熟妇乱XXX1区,夜夜爽妓女8888视频免费观看

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識

懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識

更新時間:2022-04-20  |  點擊率:567

材料與儀器

凍存 HeLa S3 細(xì)胞
70% 乙醇 * MEM-10 胰酶/EDTA
旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5 25 cm2 組織培養(yǎng)瓶 C02 培養(yǎng)箱 Sorvall H-6000A 轉(zhuǎn)子 100 ml 或 200 ml 通氣旋轉(zhuǎn)瓶和帶濾膜的瓶蓋

步驟

1. 將含有凍存 HeLa S3 細(xì)胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。

2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進(jìn)行消毒,打開安瓿,用吸管將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有 5 ml * MEM-10 培養(yǎng)基的 25 cm2 組織培養(yǎng)瓶中,輕輕搖動培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞均勻分布于培養(yǎng)瓶中,放入 5% CO2 加濕培養(yǎng)箱中 37℃ 培養(yǎng)過夜。

3. 將培養(yǎng)基吸出,用 0.5 ml 37℃ 的胰酶/EDTA 覆蓋細(xì)胞,消化 30~40 s。

4. 加入 10 ml 旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5,并將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至 50 ml 的離心管中。室溫 1800 g 離心 5 min,棄上清。

5. 將細(xì)胞沉淀懸浮在 5 ml 的旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5 中,上下吹打,將細(xì)胞團打散。

6. 在 100 ml 或 200 ml 通氣旋轉(zhuǎn)瓶中加入 50 ml 旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5,并將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到瓶中。

7. 取出 1 ml 細(xì)胞懸液,用血細(xì)胞計數(shù)器(附錄 3F) 進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。加入適量的旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5,使細(xì)胞密度為(3~4)× 105 細(xì)胞/ml。將細(xì)胞放入無 CO2 培養(yǎng)箱,37℃ 旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。

8. 隨后的兩天讓細(xì)胞繼續(xù)生長,并且每天對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù),加入適量的旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5 以維持(3~4)×105 細(xì)胞/ml 的細(xì)胞密度。

9. 取 1 ml 的細(xì)胞懸液,用血細(xì)胞計數(shù)器對細(xì)胞進(jìn)行監(jiān)測。

10. 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到(4~5)×105 細(xì)胞/ml 時,隔天或每天用培養(yǎng)基將細(xì)胞稀釋至 1.5×105 或 2.5×105 細(xì)胞/ml。

11. 分別將裝有 50 ml 或 100 ml 細(xì)胞懸液的 100 ml 或 200 ml 通氣旋轉(zhuǎn)瓶放入 37℃ 無 CO2 培養(yǎng)箱旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。每天或隔天傳代。


注意事項

由于有些細(xì)胞是不能被養(yǎng)活的,所以需要高的初始密度


Ausbian®特級胎牛血清所有血清出廠前,均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,每個批次附有詳細(xì)完整的《檢測報告》,包括:品名,貨號,批號,血源地,生產(chǎn)日期,保質(zhì)期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無菌檢查(細(xì)菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細(xì)胞病變效應(yīng)等)、促細(xì)胞生長能力、細(xì)胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

實驗人對于新批次血清,應(yīng)認(rèn)真審閱《檢測報告》,做好試用前篩選第一步。(如何看懂《檢測報告》,可登陸“締一生物"網(wǎng)站,留言技術(shù)部,得到免費幫助。)


它在國內(nèi)市場經(jīng)歷十幾年,被眾多科研工業(yè)客戶反復(fù)選擇,也是細(xì)胞典藏等重大項目十幾年的供應(yīng)品牌


人妻少妇一区二区三区| 国产AV色情成人片在线播APP| 中国人妻被两个老外三P| 高潮又爽又无遮挡又免费| 日日噜噜夜夜狠狠久久丁香五月| 国产又黄又爽又湿的免费网站| 娇小搡BBBB搡BBBB| 中文字幕一区二区人妻| 国产在线拍揄自揄拍无码视频| 校草喝下春药被男生玩弄| 国产麻传媒精品国产AV| 放荡的美妇在线播放| 国产精品久久久久久吹潮| 欧美精品无码喷液av高潮| 汽车上开两个的花苞| 巨大乳女人做爰视频在线看| 激情国产一区二区三区四区小说 | 狠狠88综合久久久久综合网| 日韩+国产| 中文字幕日韩一区二区三区不卡| 伊人成色综合人夜夜久久| 欧美亚洲国产精品久久高清| 破苞XXXX出血| 亚洲国产AV一区二区三区| 玖玖热麻豆国产精品视频| 国内精品久久久久影院欧美| 极品粉嫩国产18尤物在线播放| 不卡无码人妻一区三区音频| 国产精品99久久久久久擦边| 日本护士JZZZZZZZ无码| 国产av无码成人黄网站免费| 成人无码H免费动漫在线观看| 未满小14洗澡无码视频网站 | 情欲情欲欲超市全文无删减| 手机最好用的视频播放器| 西瓜视频高清在线观看免费| 玩50岁四川熟人A片| 岳打开双腿开始配合交换| 99久久国产热无码精品免费| 久久精品国产| 国产精品毛片一区二区三区|