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非動物源性培養(yǎng)基使用前后有哪些需要注意的事項?

更新時間:2022-05-20  |  點(diǎn)擊率:439
  非動物源性培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要,添加一些自身無法合成的化合物,即生長因子。有些微生物,如自養(yǎng)型微生物,不需要碳源,所以上述物質(zhì)只具有一般性。
  非動物源性培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌,防止污染應(yīng)該注意以下事項
  1.確認(rèn)工作細(xì)胞庫是否被污染,確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染,確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細(xì)菌、真菌及支原體無菌試驗(yàn)來確認(rèn)并排除。同時要對無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。
  2.高壓滅菌設(shè)備、過濾設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證,確保滅菌和效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個月進(jìn)行驗(yàn)證,后者應(yīng)在每次前、后進(jìn)行驗(yàn)證工作。
  3.應(yīng)將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴(yán)格分開,并有各自獨(dú)立的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,有毒區(qū)對無毒區(qū)應(yīng)保持相對負(fù)壓,防止病毒對培養(yǎng)細(xì)胞(尤其是細(xì)胞庫)的污染。
  非動物源性培養(yǎng)基容易產(chǎn)生性能不穩(wěn)定的情況,造成前后批次結(jié)果不一致,從而檢測結(jié)果不具有可比性。因動物源性培養(yǎng)基主要采用動物源性的蛋白胨,其復(fù)合成分及其比例并不清楚,也不固定。培養(yǎng)基的質(zhì)量不穩(wěn)定和不規(guī)范,直接影響微生物檢驗(yàn)和研究結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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