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盤(pán)點(diǎn)脫脂胎牛血清的幾種常見(jiàn)制備方法

更新時(shí)間:2023-09-12  |  點(diǎn)擊率:585

脫脂胎牛血清與常規(guī)胎牛血清相比,包括去除內(nèi)源性脂類(lèi)、磷脂、甘油三酯、脂肪酸、游離脂肪酸和膽固醇等成分在內(nèi)的脂類(lèi)物質(zhì)含量更低,適合一些對(duì)脂類(lèi)敏感的細(xì)胞系、脂質(zhì)代謝研究或動(dòng)脈硬化研究。。

 

脫脂胎牛血清的處理方法有很多,常見(jiàn)的主要有以下幾種:

 

1、離心法:該方法是應(yīng)用比較廣泛的方法之一。先將胎牛血清放入離心管中,然后進(jìn)行高速離心。在高速離心的作用下,脂質(zhì)會(huì)聚集在血清樣品的表面形成一層脂肪沉淀,然后可以通過(guò)小心地將上清液(脫脂后的液體部分)分離出來(lái),從而減少脂質(zhì)含量。

2、超濾法:超濾是另一種脫脂的方法,通過(guò)使用特殊的過(guò)濾器來(lái)分離脂質(zhì)。這些過(guò)濾器的孔徑足夠小,可以阻止脂質(zhì)通過(guò),但允許其他組分通過(guò)。通過(guò)使用不同孔徑的過(guò)濾器,可以控制去除的脂質(zhì)量。

3、溶劑提取法:溶劑提取法使用有機(jī)溶劑,如氯仿或甲醇,來(lái)提取脫脂胎牛血清中的脂質(zhì)。這個(gè)過(guò)程中,脂質(zhì)會(huì)溶解到有機(jī)溶劑中,然后可以通過(guò)蒸發(fā)溶劑來(lái)去除脂質(zhì)。

4、膜過(guò)濾法:膜過(guò)濾法(例如3 x 100 nm濾膜過(guò)濾)使用特殊的脫脂膜來(lái)分離脂質(zhì)。這些膜通常是親水性的,可以阻止脂質(zhì)通過(guò),但允許其他成分通過(guò)。脫脂胎牛血清通過(guò)這些膜時(shí),脂質(zhì)會(huì)被濾除。

5、凝膠過(guò)濾法:凝膠過(guò)濾法使用凝膠柱將脫脂胎牛血清通過(guò),脂質(zhì)會(huì)被凝膠吸附。然后,純凈的血清可以從凝膠柱中洗出。

6、其他方法,也有一些研究表明通過(guò)在FBS中加入氣相二氧化硅(Sigma, S5130, 20 g/L),混合過(guò)夜,離心,無(wú)菌過(guò)濾,也可以得到去脂胎牛血清。

 

Ausbian澳洲進(jìn)口特級(jí)胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用:

1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。

2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。

4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。

5.起酸堿度緩沖液作用。

6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

7.參與細(xì)胞凍存。

在細(xì)胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%20%(最常見(jiàn)為10%)的。具體到不同試驗(yàn),應(yīng)依據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo),或細(xì)胞類(lèi)型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來(lái)確定適宜濃度。胎牛血清應(yīng)在-20℃儲(chǔ)存,運(yùn)輸應(yīng)干冰冷鏈運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。


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