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『Ausbian進口胎牛血清』助力CD11與pre - mRNA剪接調(diào)節(jié)研究取得新進展

更新時間:2023-12-30  |  點擊率:402

細胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs),是一個絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶大家族,調(diào)節(jié)從轉(zhuǎn)錄、mRNA前加工到細胞周期的基本細胞過程。CDK通常通過與其同源周期蛋白伴侶的異二聚化激活。由于它們在調(diào)節(jié)細胞增殖和藥物性質(zhì)方面的重要作用,小分子抑制劑已經(jīng)開發(fā)用于癌癥治療的純化活化CDK復合物。

 

CDK11(也稱為CDC2L2)與細胞周期蛋白L1或細胞周期蛋白L2一起在基因調(diào)控中起作用。人類CDK11由兩個高度相似的基因CDK11ACDK11B編碼。在發(fā)現(xiàn)CDK11后不久,CDK11在體內(nèi)和體外都參與了特定底物pre - mRNA剪接的調(diào)控。與這一作用一致,CDK11被證明與剪接因子相互作用和/或磷酸化,如RNPS19G8。最近,有報道稱CDK11通過SF3B1的磷酸化在全局內(nèi)含子去除中起關(guān)鍵作用,SF3B1是一種識別分支點序列的U2小核糖核蛋白(snRNP)成分,用于剪接體激活。與其在剪接中的作用一致,CDK11定位于核斑點,這是一種動態(tài)的亞核結(jié)構(gòu),用于剪接因子的儲存和修飾。

 

除了剪接作用外,CDK11還磷酸化RNA聚合酶II C末端結(jié)構(gòu)域(CTD)2號和5號絲氨酸,表明其參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控。它還調(diào)節(jié)特定pre - mRNA3 '加工。例如,CDK11通過3 '加工因子FLASH被招募到依賴復制的組蛋白mRNA上,促進它們的3 '切割。同樣,CDK11被轉(zhuǎn)錄/輸出復合體TREX募集到HIV DNA上,通過促進切割因子的結(jié)合來增強病毒RNA3 '加工。

 

除了在整個細胞周期中普遍表達的全長CDK11外,N端截斷的CDK11蛋白異構(gòu)體(P58)G2/M期通過內(nèi)部核糖體進入位點特異性翻譯,并且是有絲分裂進程所必需的。與CDK11在基因調(diào)控和細胞周期控制中的重要作用一致,CDK11是正常細胞和幾種類型癌細胞增殖所必需的,并已成為癌癥治療的一個有希望的靶點。然而,活性CDK11復合物的調(diào)控機制和組成仍然知之甚少。

 

SAP30BP是一種特性有限的蛋白。它最初被鑒定為一種由單純皰疹病毒1(HSV‐1)誘導的蛋白,并與轉(zhuǎn)錄輔酶抑制因子mSin3A的一個組分SAP30相互作用。在這項研究中,科研人員發(fā)現(xiàn),在人類細胞中,CDK11與細胞周期蛋白L1/L2SAP30BP形成緊密結(jié)合的復合物。利用高效的降解系統(tǒng),研究發(fā)現(xiàn)SAP30BP在全球pre - mRNA剪接中發(fā)揮類似于CDK11的作用。

 

此外,通過確保細胞周期蛋白L1/L2CDK11的穩(wěn)定性和組裝,證明了SAP30BP在體內(nèi)和體外激活CDK11??傊?span>SAP30BP作為CDK11的重要激活因子,并共同調(diào)節(jié)全局pre - mRNA剪接。

 

本研究中,針對HeLaHAP1兩種細胞進行體外培養(yǎng)實驗,用到了Ausbian進口特級胎牛血清。


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