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單核細(xì)胞活化測試是什么?

更新時間:2024-08-02  |  點擊率:500

單核細(xì)胞活化測試(Monocyte Activation Test,簡稱MAT)是一種體外檢測方法,主要用于評估供試品中是否存在能夠激活單核細(xì)胞釋放促炎細(xì)胞因子的污染物,如內(nèi)毒素、細(xì)菌、病毒、真菌等。這些污染物在人體內(nèi)可能引發(fā)發(fā)熱等不良反應(yīng),因此單核細(xì)胞活化測試在藥品、生物制品、醫(yī)療器械等領(lǐng)域的安全性評價中具有重要意義。

 

測試原理

單核細(xì)胞活化測試基于單核細(xì)胞或單核細(xì)胞系在受到外源性致熱原(如內(nèi)毒素)刺激后,會釋放一系列促炎細(xì)胞因子(如TNF-α、IL-1βIL-6等)的生物學(xué)特性。通過檢測這些細(xì)胞因子的釋放量,可以間接反映供試品中污染物的致熱活性。

 

測試步驟

細(xì)胞準(zhǔn)備:通常使用人外周血單核細(xì)胞或單核細(xì)胞系作為測試細(xì)胞。

孵育:將供試品與測試細(xì)胞在適宜條件下共孵育一段時間,使供試品中的污染物有機會激活單核細(xì)胞。

細(xì)胞因子檢測:通過酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)等定量檢測方法,檢測孵育后培養(yǎng)液中促炎細(xì)胞因子的濃度。

結(jié)果判讀:根據(jù)細(xì)胞因子的釋放量,判斷供試品中是否存在致熱原及其含量是否符合要求。

測試優(yōu)勢

靈敏度高:能夠檢測到極低濃度的內(nèi)毒素和其他致熱原。

非動物實驗:與家兔熱原檢測相比,單核細(xì)胞活化測試不需要使用實驗動物,符合倫理和環(huán)保要求。

省時經(jīng)濟:測試周期短,成本低,適合大規(guī)模篩查。

適用范圍廣:可檢測內(nèi)毒素和非內(nèi)毒素?zé)嵩?,包括?xì)菌、病毒、真菌等多種病原體。

注意事項

操作規(guī)范:測試過程中應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,防止微生物和熱原的污染。

細(xì)胞質(zhì)量控制:測試細(xì)胞應(yīng)具有良好的活性和純度,以保證測試結(jié)果的準(zhǔn)確性。

結(jié)果解讀:細(xì)胞因子釋放量的高低受多種因素影響,如細(xì)胞類型、孵育條件等,因此應(yīng)結(jié)合實際情況綜合判斷測試結(jié)果。

 

總之,單核細(xì)胞活化測試是一種重要的體外熱原檢測方法,在保障藥品、生物制品和醫(yī)療器械的質(zhì)量和安全性方面發(fā)揮著重要作用。


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