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維生素測(cè)定培養(yǎng)基生產(chǎn)和使用容易遇到的問題

更新時(shí)間:2018-09-20  |  點(diǎn)擊率:1537
   維生素測(cè)定培養(yǎng)基生產(chǎn)和使用容易遇到的問題
  
  微生物法測(cè)定食品中的維生素B12、葉酸是國家食品安全標(biāo)準(zhǔn)中的方法。因其檢出限低、靈敏度高、測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠,受到了國內(nèi)的廣泛青睞。在該方法中要用到三種培養(yǎng)基:貯存菌用培養(yǎng)基、接種菌用培養(yǎng)基、維生素測(cè)定用培養(yǎng)基。其中維生素測(cè)定用培養(yǎng)基重要,也為關(guān)鍵。
  
  鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品,使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別,因而有助開快速鑒別某種微生物。這樣的培養(yǎng)基稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。半固體培養(yǎng)基指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。脫水培養(yǎng)基又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。
  
  維生素測(cè)定培養(yǎng)基生產(chǎn)和使用常見問題:
  
  1.維生素測(cè)定培養(yǎng)基能用肉眼判斷其pH值嗎?
  
  答:維生素測(cè)定培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗(yàn)來判定pH值,建議使用pH計(jì)進(jìn)行測(cè)定。
  
  2.維生素測(cè)定培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)是什么?
  
  答:平衡鹽一般是由無機(jī)鹽及葡萄糖組成的。平衡鹽有Hanks′系統(tǒng)、Earle′s系統(tǒng)、Dulbecco′s磷酸緩沖鹽系統(tǒng)等。
  
  3.谷氨酰胺溶液和碳酸氫鈉的配制方法是什么?
  
  答:以0.2mol/L的L-谷氨酰胺配制為例:稱取L-谷氨酰胺2.92g,加注射用水100ml,充分?jǐn)嚢杌靹?。?.2μm濾膜正壓過濾除菌。溶液應(yīng)在4℃下避光保存,2周內(nèi)使用。
  
  以7.5%NaHCO3的配制為例:稱取NaHCO37.5g溶于100ml蒸餾水中過濾除菌。
  
  4.什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
  
  答:酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。酚紅本身對(duì)生物制品質(zhì)量并不會(huì)產(chǎn)生影響,可以通過純化技術(shù)去除,但酚紅在無血清培養(yǎng)基可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細(xì)胞生長,當(dāng)然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過程中都使用無酚紅培養(yǎng)基。
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