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您了解透析胎牛血清的三大用途嗎?

更新時(shí)間:2021-01-27  |  點(diǎn)擊率:845

透析胎牛血清也是用于細(xì)胞培養(yǎng),但同時(shí),又有自己的一些特殊應(yīng)用。本文締一生物為您分析透析胎牛血清的三大用途。

 

一、摻入研究

例如:有人研究呼吸道合胞病毒的宿主特異性:即為什么它只感染呼吸道上皮細(xì)胞,而不感染其他細(xì)胞。

他們將該病毒的F蛋白(融合蛋白)序列克隆入質(zhì)粒內(nèi),并轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞。轉(zhuǎn)染后第20小時(shí),細(xì)胞先在不含蛋氨酸和半胱氨酸的DMEM+透析胎牛血清中培養(yǎng)了45分鐘(讓細(xì)胞處于饑餓狀態(tài),因培養(yǎng)基中缺少氨基酸),再在同樣上述培養(yǎng)基中培養(yǎng),但添加了35S標(biāo)記的蛋氨酸和半胱氨酸。

培養(yǎng)4小時(shí)后進(jìn)行分析。即裂解細(xì)胞后,用抗F蛋白的抗體捕獲F蛋白、跑膠并進(jìn)行放射自顯影,分析F蛋白的表達(dá)情況。發(fā)現(xiàn)F蛋白的表達(dá)確實(shí)增加了,但突變后的F蛋白表達(dá)卻無(wú)任何變化。結(jié)果證實(shí),野生型的F蛋白確實(shí)參與病毒對(duì)宿主細(xì)胞的侵襲。

值得指出的是,用35S標(biāo)記的蛋氨酸和半胱氨酸用來(lái)標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)的蛋白,結(jié)合免疫沉淀用于觀察在某一過(guò)程中發(fā)生的某一蛋白的變化,從而發(fā)現(xiàn)該蛋白所扮演的角色,的確是一個(gè)普遍有效的方法(在研究信號(hào)分子磷酸化的方面,則需要使用32P標(biāo)記的磷酸鹽)。

在這其中,透析胎牛血清的使用*,即給細(xì)胞創(chuàng)造一個(gè)無(wú)外源氨基酸干擾的環(huán)境。

二、細(xì)胞水平的藥物篩選

例如:有人要從化合物庫(kù)中篩選S1P4受體的拮抗劑,以抑制流感病毒帶來(lái)的免疫激活導(dǎo)致的肺損傷。他采用報(bào)告基因進(jìn)行監(jiān)測(cè)。為了避免細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中存在的小分子的干擾,他也需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。

類似在藥物研發(fā)過(guò)程中,采用特定啟動(dòng)子操縱的熒光素酶報(bào)告基因,基于細(xì)胞平臺(tái)的高通量藥物篩選,也都需要無(wú)外源小分子的培養(yǎng)體系,因而也要用透析胎牛血清。

三、細(xì)胞克隆的篩選

包括雜交瘤細(xì)胞和CHO細(xì)胞等,由于在進(jìn)行細(xì)胞篩選時(shí),需要無(wú)外源小分子如次黃嘌呤和胸腺嘧啶等的干擾,因此也需要用到透析胎牛血清。

 

產(chǎn)品說(shuō)明

采用Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清,透析過(guò)濾去除10000D以下小分子(如次黃嘌呤和胸腺核苷),避免外源小分子對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生干擾。適合脈沖示蹤實(shí)驗(yàn)(例如同位素標(biāo)記特定小分子,并加入到培養(yǎng)體系中,以研究細(xì)胞代謝),也適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選等應(yīng)用。

 

描述

1. 精選內(nèi)毒素更低批次,細(xì)胞更健康。

2.每個(gè)批次提供完整的檢測(cè)報(bào)告。

3.全程冷鏈運(yùn)輸,不出現(xiàn)凍融現(xiàn)象,保證質(zhì)量不受影響。

4.100毫升,500毫升多種包裝選擇,適合不同實(shí)驗(yàn)用量需求。

5.國(guó)內(nèi)現(xiàn)貨儲(chǔ)備,避免貨運(yùn)風(fēng)險(xiǎn)。

 
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