公车上拨开丁字裤进入电影,久久99精品久久久久久无毒不卡,国产丰满老熟妇乱XXX1区,夜夜爽妓女8888视频免费观看

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  細(xì)胞培養(yǎng)之懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)之懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

更新時(shí)間:2022-04-15  |  點(diǎn)擊率:714

材料與儀器

凍存 HeLa S3 細(xì)胞
70% 乙醇 * MEM-10 胰酶/EDTA
旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5 25 cm2 組織培養(yǎng)瓶 C02 培養(yǎng)箱 Sorvall H-6000A 轉(zhuǎn)子 100 ml 或 200 ml 通氣旋轉(zhuǎn)瓶和帶濾膜的瓶蓋

步驟

1. 將含有凍存 HeLa S3 細(xì)胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。

2. 用 70% 乙醇對(duì)安瓿的頂端進(jìn)行消毒,打開安瓿,用吸管將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有 5 ml * MEM-10 培養(yǎng)基的 25 cm2 組織培養(yǎng)瓶中,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞均勻分布于培養(yǎng)瓶中,放入 5% CO2 加濕培養(yǎng)箱中 37℃ 培養(yǎng)過夜。

3. 將培養(yǎng)基吸出,用 0.5 ml 37℃ 的胰酶/EDTA 覆蓋細(xì)胞,消化 30~40 s。

4. 加入 10 ml 旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5,并將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至 50 ml 的離心管中。室溫 1800 g 離心 5 min,棄上清。

5. 將細(xì)胞沉淀懸浮在 5 ml 的旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5 中,上下吹打,將細(xì)胞團(tuán)打散。

6. 在 100 ml 或 200 ml 通氣旋轉(zhuǎn)瓶中加入 50 ml 旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5,并將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到瓶中。

7. 取出 1 ml 細(xì)胞懸液,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器(附錄 3F) 進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。加入適量的旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5,使細(xì)胞密度為(3~4)× 105 細(xì)胞/ml。將細(xì)胞放入無 CO2 培養(yǎng)箱,37℃ 旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。

8. 隨后的兩天讓細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng),并且每天對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),加入適量的旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-5 以維持(3~4)×105 細(xì)胞/ml 的細(xì)胞密度。

9. 取 1 ml 的細(xì)胞懸液,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器對(duì)細(xì)胞進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

10. 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到(4~5)×105 細(xì)胞/ml 時(shí),隔天或每天用培養(yǎng)基將細(xì)胞稀釋至 1.5×105 或 2.5×105 細(xì)胞/ml。

11. 分別將裝有 50 ml 或 100 ml 細(xì)胞懸液的 100 ml 或 200 ml 通氣旋轉(zhuǎn)瓶放入 37℃ 無 CO2 培養(yǎng)箱旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。每天或隔天傳代。


Ausbian®特級(jí)胎牛血清所有血清出廠前,均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,每個(gè)批次附有詳細(xì)完整的《檢測(cè)報(bào)告》,包括:品名,貨號(hào),批號(hào),血源地,生產(chǎn)日期,保質(zhì)期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無菌檢查(細(xì)菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細(xì)胞病變效應(yīng)等)、促細(xì)胞生長(zhǎng)能力、細(xì)胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

實(shí)驗(yàn)人對(duì)于新批次血清,應(yīng)認(rèn)真審閱《檢測(cè)報(bào)告》,做好試用前篩選第一步。(如何看懂《檢測(cè)報(bào)告》,可登陸“締一生物"網(wǎng)站,留言技術(shù)部,得到免費(fèi)幫助。)


它在國(guó)內(nèi)市場(chǎng)經(jīng)歷十幾年,被眾多科研工業(yè)客戶反復(fù)選擇,也是細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目十幾年的供應(yīng)品牌


亚洲熟妇无码爱V在线观看| 韩国久久久久久级做爰片 | 波多野中文无码av人妻系列视频 | 女上男下野战GIF动态图| 初品尝的美艳人妻| 超级YIN荡的高中女H文校园| 亚洲乱码国产乱码精品精大量| 亚洲国产成人精品无码区在线秒播| 麻豆一区二区99久久久久| 九色少妇丨PORNY丨蝌蚪| 黑人猛挺进小莹的体内视频| 日本a级作爱片| 少妇作愛爽到呻吟69XX| 免费看片A级毛片免费看| 国内精品国产成人国产三级 | 3男s调教玩弄一女m文| 国自产拍av在线天天更新| 欧美三日本三级少妇三级久久| 国产精品久久久久久久久爆乳 | 精品久久久久中文字幕| 国产精品99久久久久久宅男| 放荡娇妻张开腿任人玩H| 97人妻天天爽夜夜爽二区| 房东天天吃我奶躁我| 成年免费视频黄网站在线观看| 国产亚洲精品99一区二区| 人人妻人人澡人人爽国产一区| 精品人妻一区二区三区四区在线 | 成熟YIN荡美妞A片视频麻豆| 波多野结衣网站| 97精品人妻系列无码人妻| 人妻熟妇乱又伦精品视频APP| 国产成人午夜精品一区二区三区| 吃瓜黑料视频永久地址| 少妇被粗大的猛烈进出免费视频 | 无码国产精品成人午夜视频| 亚洲国产精品自在自线观看| 丰满人妻被公侵犯完整版| 边啃奶头边躁狠狠躁| 国产精品亚洲一区二区无码| 精品2022露脸国产偷人在视频|